نشاندارسازی، کنترل کیفی و پراکنش زیستی پادتن anti-CD20 با گالیوم-67

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 پژوهشکده تحقیقات کشاورزی، پزشکی و صنعتی، پژوهشگاه علوم و فنون هسته‌ای، سازمان انرژی اتمی ایران، صندوق پستی: 498-31485، کرج- ایران

2 گروه بیولوژی، دانشگاه پیام نور، ناحیه 10، تهران ـ ایران

3 1- پژوهشکده تحقیقات کشاورزی، پزشکی و صنعتی، پژوهشگاه علوم و فنون هسته‌ای، سازمان انرژی اتمی ایران، صندوق پستی: 498-31485، کرج- ایران

چکیده

در حال حاضر برخی پادتن‌های anti-CD20 به صورت ساده یا نشاندار شده با رادیوایزوتوپ‌ها در درمان لنفوم کاربرد دارند. به منظور تهیه فرم نشاندار رادیوایزوتوپی، مزدوج‌سازی پادتن به وسیله ماده دو عامله سنتز شده DOTA-NHS در آزمایشگاه نشاندارسازی مواد صورت گرفت. بررسی‌های کروماتوگرافی لایه نازک برای کنترل واکنش و در نهایت، کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل برای جداکردن مواد اضافی با جرم مولکولی کمتر از پروتئین مزدوج انجام شد. رادیوایزوتوپ گالیوم-67 به صورت 67GaCl3 تولید شده در سیکلوترون کرج، برای نشاندارسازی کمپلکس حاصل بکار رفت و شرایط نشاندارسازی (از جمله دما، زمان و غلظت مواد) بهینه شدند. کنترل کیفی به وسیله کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل و لایه نازک انجام گرفت. خلوص رادیوشیمیایی در حدود 95% تعیین شد. ماده نشاندار برای بررسی پراکنش زیستی به مدت 28 ساعت در موش صحرایی تجویز و پس از 24 ساعت تجمع کمپلکس در سیستم رتیکولواندوتلیال مانند کبد و طحال دیده شد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Radiolabeling Quality Control and Biodistribution Study of Anti-CD20 Antibody by 67Ga

نویسندگان [English]

  • A.R Jalilian 1
  • L Mirsadeghi 2
  • A Khorrami 3
  • S Moradkhani 3
  • B Naserian 3
  • S Daneshvari 3
  • N Shadanpour 3
  • H Ghahreman 3
  • R Haji-Hosseini 2
چکیده [English]

Nowadays, anti-CD20 antibodies are being used in the therapy of lymphomas in free or radiolabeled form. Conjugation process was performed using native antibody and DOTA-NHS compound, synthesized in our laboratory. Thin layer chromatography and gel filtration were used to control the reaction progress as well as purification of the final antibody conjugate. 67GaCl3 produced at AMIRS was used to label the immunoconjugate and the reaction conditions were optimized for time, temperature and reactant concentrations. Quality control of the radioimmunoconjugate was performed using RTLC and gel filtration. The radiochemical purity was shown to be over 95%. The radioimmunoconjugate was used in the biodistribution studies up to 28 h and it was shown that after 24h most of the activity was accumulated in reticuloendothelial system consisting liver and spleen.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Anti-CD20
  • DOTA
  • 67Ga
  • Rituximab
  • Cyclotron
  • Quality Control
  • Biodistribution
  • Labeling
  • Radioisotope production
  1. 1.    T.E. Witzig, C.A. White, G.A. Wiseman, L.I. Gordon, C. Emmanouilides, A. Raubitschek, N. Janakiraman, J. Gutheil, R.J. Schilder, S. Spies, D.H. Silverman, E. Parker, A.J. Grillo-Lopez, “Phase I/II trial of IDEC-Y2B8 radioimmunotherapy for treatment of relapsed or refractory CD20(+) B-cell non-Hodgkin's lymphoma,” J. Clin. Oncol. 17, 3793–3803 (1999).

 

  1. 2.    J.F. Eary, O.W. Press, C.C. Badger, L.D. Durack, K.Y. Richter, S.J. Addison, K.A. Krohn, D.R. Fisher, B.A. Porter, D.L. Williams DL, et al, “Imaging and treatment of B-cell lymphoma,” J. Nucl. Med. 31, 1257–1268 (1990).

 

  1. 3.    S.J. Knox, R. Levy, R.A. Miller, W. Uhland, J. Schiele, W. Ruehl, R. Finston, P. Day-Lollini, M.L. Goris, “Determinants of the antitumor effect of radiolabeled monoclonal antibodies,” Cancer Res. 50, 4935-4940 (1990).

 

  1. 4.    R.A. Kyle, M.A. Gertz, P.R. Greipp, T.E. Witzig, J.A. Lust, M.Q. Lacy, T.M. Therneau,Long-term survival (10 years or more) in 30 patients with primary amyloidosis,” Blood, 93(3), 1062-1066 (1999).

 

  1. 5.    M. Dietlein, H. Pels, H. Schulz, O. Staak, P. Borchmann, K. Schomäcker, T. Fischer, W. Eschner, E.P. von Strandmann, H. Schicha, A. Engert, R. Schnell, “Imaging of central nervous system lymphomas with iodine-123 labeled rituximab,” Eur. J. Haematol. 74, 348-352 (2005).

 

  1. 6.    J. Hoffend, W. Mier, J. Schuhmacher, K. Schmidt, A. Dimitrakopoulou-Strauss, L.G. Strauss, M.E.R. Kinscherf, U. Haberkorna, “Gallium-68-DOTA-albumin as a PET blood-pool marker: experimental evaluation in vivo,” Nucl. Med. Biol. 32, 287–292 (2005).

 

  1. 7.    O. Ugur, P.J. Kothari, R.D. Finn, P. Zanzonico, S. Ruan, I. Guenther, H.R. Maecke, S.M. Larson, “Ga-66 labeled somatostatin analogue DOTA-DPhe1-Tyr3-octreotide as a potential agent for positron emission tomography imaging and receptor mediated internal radiotherapy of somatostatin receptor positive tumors,” Nucl. Med. Biol. 29, 147–157 (2002).

 

  1. 8.    M.R. McDevitt, D.Ma,J. Simon, R.K. Frank, D.A. Scheinberg, “Design and synthesis of 225Ac radioimmun opharmaceuticals,”  Applied Radiat. Isot. 57, 841–847 (2002).
  2. 9.    C.J. Smith, H. Gali, G.L. Sieckman, D.L. Hayes, N.K. Owen, D.G. Mazuru, W.A. Volkert, T.J. Hoffman, “Radiochemical investigations of 177Lu-DOTA-8-Aoc-BBN[7-14] NH2: an in vitro/in vivo assessment of the targeting ability of this new radiopharmaceutical for PC-3 human prostate cancer cells,” Nucl. Med. Biol. 30, 101–109 (2003).

 

  1. 10.              L.L. Chappell, E. Dadachova, D.E. Milenic, K. Garmestani, C.Wu, M.W. Brechbiel, “Synthesis, Characterization, and Evaluation of a Novel Bifunctional Chelating Agent for the Lead Isotopes 203Pb and 212Pb,” Nucl. Med. & Biol. 27, 93–100 (2000).

 

11. S. Banerjee, T. Das, S. Chakraborty, G. Samuel, A. Korde, S. Srivastava, M. Venkatesha, M.R.A. Pillai, “177Lu-DOTA-lanreotide: A novel tracer as a targeted agent for tumor therapy,” Nucl. Med. Biol. 31, 753–759 (2004).

 

12. W. Mier, J. Hoffend, S. Kramer, J. Schuhmacher, W.E. Hull, M. Eisenhut,  “Conjugation of DOTA using isolated phenolic active esters: The labeling and biodistribution of albumin as a blood-pool marker,” Bioconjug. Chem. 16, 237–240 (2005).

 

13. U. Pandey, A. Mukherjee, H.D. Sarma, T. Das, M.R.A. Pillai, M. Venkatesh, “Evaluation of 90Y-DTPA and 90Y-DOTA for potential application in intra-vascular radionuclide therapy,” Appl. Rad. Isot. 57, 313-318 (2002).

 

  1. 14.              P. Goethals, M. Coene, G. Slegers, D. Vogelaers, J. Everaert, I. Lemahieu, F. Colardyn, G.R. Heyndrickx, “Production of carrier-free 66Ga and labeling of antimyosin antibody for positron imaging of acute myocardial infarction,” Eur. J. Nucl. Med. 16, 237-240 (1990).

 

  1. 15.              J. Kowalski, M. Henze, J. Schuhmacher, H.R. Macke, M. Hofmann, U. Haberkorn. “Evaluation of positron emission tomography imaging using [68Ga]-DOTA-D Phe(1)-Tyr(3)-Octreotide in comparison to [111In]-DTPAOC SPECT. First results in patients with neuroendocrine tumors,” Mol. Imaging Biol. 5(1), 42-48 (2003).

 

16. U.K. Laemmli, “Cleavage of structural proteins during assembly of the head of the bacteriophage T4,” Nature (London),227, 680–685 (1970).